近日,我院柑橘种质创新与利用团队在二区期刊《horticulture》(IF=3.0)发表题为“Fluorescent SSR Based DNA Fingerprinting and Molecular Identity Card Development for 69 Mandarin Accessions”的研究论文。
为了建立标准化宽皮柑橘DNA指纹与分子鉴定体系,本研究利用荧光SSR毛细管电泳技术对69份宽皮柑橘种质资源进行了分析,构建了其DNA分子指纹及分子身份证。筛选出18对高多态性SSR引物,共获得239个基因型数据和147个等位基因。每对引物扩增的等位基因数量为4至18个,多态性信息含量(PIC)介于0.411至0.650之间。进一步筛选出10对核心引物,其品种区分率达65.2%(即69份种质中有45份可被区分)。利用上述荧光SSR标记,成功构建了全部69份种质的DNA分子指纹图谱和分子身份证。其中,45份种质具有独特的指纹图谱。本研究为宽皮柑橘种质资源的鉴定、保护及遗传关系分析提供了实用基础,并为规范宽皮柑橘的品种鉴定建立了技术框架。

图1 指纹图谱的构建
本研究仍存在局限性。未来的工作将针对这些局限性,通过以下方式加以改进:(1)扩大种质资源范围,纳入更多野生和栽培宽皮柑橘种质,建立全面的分子身份证数据库;(2)整合先进技术(如转座子展示、靶向SSR测序和全基因组测序),提高对芽变品种的区分能力;(3)在多环境、多年度的试验中对已开发的分子身份证进行验证,以增强其在品种实际鉴定中的可靠性;(4)将分子身份证与表型性状相结合,解决柑橘命名冲突问题,并厘清遗传关系。这些努力将推动宽皮柑橘种质资源管理,支持知识产权保护,并促进柑橘产业的可持续发展。

图2 分子身份证结果
广西特色作物研究院武晓晓高级农艺师为论文的第一作者,邓崇岭研究员为通讯作者,陈传武、方海猛、娄兵海、刘萍等参与了研究。该研究得到了国家自然科学基金(U23A20198)、广西柑橘创新团队(nycytxgxcxtd-2021-05)、广西特色作物试验总站(TS202101)等项目的资助。
(武晓晓 文/图)
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